您好,欢迎来到佳博论文网!请记住本站网址:www.jiabolunwen.net

玉郎伞黄酮成分的单体分离与药效研究

作者:admin  作者本人请参看权力声明

导师姓名: 

学位授予单位: 

授予学位:

学位年度:

专业:马克思主义哲学 

关键词:成分 玉郎 伞黄 酮 单体 分离

摘要:(该内容经过伪原创处理,请直接查看目录)

  • 目的:本实验通过对妇血康颗粒治疗功血作用机制的实验研究,明确其止血作用发生的机制,为进一步提纯滇桂艾纳香的有效成分打下基础。 方法:通过离体子宫实验观察药物及药物血清对大鼠子宫的影响;通过检测小鼠剪尾出血时间,毛细管、玻片凝血时间,PT、RT等研究药物对血液止血途径的影响:通过二甲苯致耳肿胀实验、角叉菜胶致足肿胀实验、毛细血管通透性实验、棉球植入肉芽肿实验,了解药物的抗炎作用;通过检测血清E2、P、FSH、LH,研究药物对未成年大鼠下丘脑一垂体.卵巢轴的影响;通过计算子宫、卵巢系数,卵泡计数,子宫、卵巢病

  • 目的:通过小鼠、豚鼠、Beagle犬的类过敏反应试验,筛选一个敏感度、准确率高的类过敏反应试验方法,通过吐温80的定性定量检测,调查中药注射剂中吐温80的情况,选择含有吐温80的品种进行类过敏试验,探讨吐温80对中药注射剂致敏性的影响,从辅料方面寻找一个解决某些中药注射剂致敏性的方法。 方法:1、小鼠类过敏试验:小鼠一次性尾静脉注射给药致敏,给药剂量采用成人日用量的15倍(公斤体重),给药容积0.5ml/只,给药后观察小鼠的行为学取血检测血浆中组胺(Histamine)含量,以行为学评分(behavior

  • 目的:⑴考察玉郎伞总黄酮的提取工艺:在前期研究的基础上,对玉郎伞总黄酮提取工艺进行优化。⑵分离、纯化玉郎伞黄酮的单体成分并进行结构鉴定:运用先进的植化分离、纯化、鉴定技术,得到玉郎伞黄酮的活性单体并鉴定结构。⑶玉郎伞黄酮单体的抗氧化、抗凝血、耐缺氧作用研究。⑷研究玉郎伞黄酮单体及含药血清对心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用。⑸研究玉郎伞黄酮单体及含药血清对H2O2诱发心肌细胞凋亡的作用及机制。 方法:①YLS总黄酮的提取工艺考察;②玉郎伞黄酮成分的单体分离、纯化及结构鉴定;③玉郎伞黄酮单体的抗氧化、抗

  • 分享到: 分享到QQ 分享到微信
    目的:⑴考察玉郎伞总黄酮的提取工艺:在前期研究的基础上,对玉郎伞总黄酮提取工艺进行优化。⑵分离、纯化玉郎伞黄酮的单体成分并进行结构鉴定:运用先进的植化分离、纯化、鉴定技术,得到玉郎伞黄酮的活性单体并鉴定结构。⑶玉郎伞黄酮单体的抗氧化、抗凝血、耐缺氧作用研究。⑷研究玉郎伞黄酮单体及含药血清对心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用。⑸研究玉郎伞黄酮单体及含药血清对H2O2诱发心肌细胞凋亡的作用及机制。 方法:①YLS总黄酮的提取工艺考察;②玉郎伞黄酮成分的单体分离、纯化及结构鉴定;③玉郎伞黄酮单体的抗氧化、抗凝血、耐缺氧作用研究;④研究玉郎伞黄酮单体及含药血清对心肌细胞H/R的作用;⑤玉郎伞黄酮单体及含药血清对H2O2诱发心肌细胞凋亡的作用及机制 结果:⑴YLS总黄酮的提取方法优化。确定以微波辅助萃取的方式进行玉郎伞总黄酮的提取。具体工艺为:将YLS饮片粉碎,以60%乙醇为提取溶剂,料液比1:8,提取温度<60℃,微波功率240 W,提取时间20 min,提取1次。按此方法操作,总黄酮提取率为:3.16%(以生药计),总黄酮含量为22.5%(以芦丁为对照)。⑵玉郎伞黄酮成分的单体分离、纯化及结构鉴定。YLS A: C17H16O3,淡黄色针晶,mp.120.0-121.0℃;UV(MeOH)λmax(nm):260,300; ESI-MS m/z:291.17[M+Na]+,307.13[M+K]+.IR(KBr)(cm-1):3501,3123,2929,2852,1789,1623,1604,1568,1528,1462,1372,1285,1228,1165,1133;1HNMR(DMSO-d6,500MHz)δ:3.86(6H,s,H-OCH3X2, H-7,8),7.60(1H, brd, J=6.9 Hz, H-4),7.60(5H,m. H-2'、3'、4'、5'、6'),7.72(1H, J=8.8Hz, H-α),8.00(1H,d,J-8.8Hz,H-β),8.13(2H, brd, J=6.5Hz, H-3,5);13CNMR(DMSO-d6,125 MHz)δ:174.2(C-7'),110.6(C-α),121.5(C-β),119.6(C-1),147.8(C-2,6),128.6(C-3,5),130.9(C-4),130.9(C-1'),129.2(C-2'、3'、4'、5'、6'),60.2(C-7),60.2(C-8)。结合HSQC、HMBC、NOSEY谱,确定其结构式为:Cis(顺)-2,6-=甲氧基查尔酮,首次从YLS植物中分离,经查阅SciFinder数据库表明:此化合物亦为首次分离及报道核磁数据。YLS B: C18H14O4,桔色方晶,mp.135.0-136.0℃;UV(MeOH)λmax(nm):238,350; ESI-MS m/z:295.00[M+H]+,610.99[2M+Na]+,263.35[M-OMe]+; IR(KBr)(cm-1):3501,3133,2929,2831,1739,1600,1562,1474,1380,1262,1219,1137,1102,1062,1025;1HNMR( CDCl3,500MHz),δ:3.95(3H,s,-OCH3),7.2(1H,d,H-5’),8.2(1H,d,H-4’),8.17(2H,s,H-2’,6’),7.77(1H,s,H-α),7.57(5H, m. H-2,3,4,5,6);13CNMR(CDCl3,125MHz),δ:60.2(C-9’),104.2(C-α),110.0(C.5’),117.0(C-3’),119.8(C-8’),122.0(C-1’),128.4(C-2’),128.6(C-2,4,6),130.6(C-3,5),141.8(C-1),145.7(C-4’),150.0(C.6’),154.8(C-7’),158.2(C-β),175.0(C=O);Crystal data: Monocli-nic, P2(1)/c,a=10.8813(16)nm,b=9.7954(14) nm,c=13.3473(19) nm,α=900,β=103.697(2)°,γ=90°, V=1382.2(3) nm3,2-4, Dc=1.414 mg/m3,F(000)=616,μ=0.100mm-1。确定其结构式为:Cis(顺)-6’-甲氧基-β-羟基-苯骈呋喃查耳酮,系首次从YLS植物中分离。经查SciFinder数据库未见相同结构报道,为一新化合物。⑶玉郎伞黄酮单体的抗氧化、抗凝血、耐缺氧作用:与空白对照组相比,YLS A~B单体的低、中、高浓度(终浓度分别为0.5、1.0、2.0 mg.ml-1)均能清除·O2、·OH,抑制·02-的生成(P<0.01)并呈浓度依赖性。其中,高浓度组效果最佳;与正常对照组相比,YLS A~B低剂量组均无明显抗凝血作用(P>0.05):YLS A~B中、高剂量组则可使凝血时间明显延长(P<0.01)。其中,高剂量组效果最好,抗凝作用与肝素钠相似(P>0.05 vs Heparin);与正常对照组相比,YLS A~B低剂量组的存活时间无差异(P>0.05),YLS A~B中、高剂量组则可显著延长缺氧小鼠的存活时间(P<0.01),其中,高剂量组效果最好,耐缺氧作用与Vit.C相似(P>0.05)。⑷玉郎伞黄酮单体及含药血清对心肌细胞H/R的作用。心肌细胞形态学变化:光镜下可见原代培养3~4d后,心肌细胞融合成片,呈放射状排列,细胞之间伸出多个伪足交织成网状,细胞搏动同步化;H/R模型组心肌细胞胞浆空泡形成,细胞伪足收缩或消失,细胞折光率下降,异形心肌细胞数目增加并有大量细胞脱离、悬浮、溶解坏死,体内搏动幅度及频率减弱,节律不齐;YLS A~B单体及含药血清组可见少量的心肌细胞伪足回缩,细胞脱落悬浮现象,但损伤程度较模型组显著减轻且死亡细胞明显减少;与模型组相比,YLS A~B单体及含药血清中、高剂量可显著增加心肌细胞活力及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性、降低心肌细胞培养上清夜中MDA、LDH、iNOS、TNF-a含量(活性)、增加T-SOD、GSH、cNOS、tNOS活性(P<0.05)。⑸玉郎伞黄酮单体及含药血清对H2O2诱发心肌细胞凋亡的作用及机制。与模型组相比,中、高剂量的YLS A~B单体及含药血清能明显降低H2O2诱发所致心肌细胞的凋亡(P<0.01)并呈剂量依赖性,以高剂量组效果最明显;与模型组相比,中、高剂量的YLS A~B单体及含药血清均能下调NF-κBp65、Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达、增加Bcl-2/Bax比值(P<0.01)。 结论:①首次从YLS植物中分离出两个黄酮类活性单体,其中一个为新化合物,另一个系首次从植物中分离并报道核磁数据。②两个YLS黄酮活性单体均具有抗氧化、抗凝血、耐缺氧、保护心肌细胞缺氧/复氧损伤、减轻心肌细胞凋亡的作用,并呈一定的剂量依赖性;其机制可能与抗氧化应激损伤、提高GSH、cNOS、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性、降低LDH、iNOS、TNF-a活性、下调NF-κBp65和Bax蛋白表达、上调Bcl-2蛋白表达、增加Bcl-2/Bax比值而抑制心肌细胞凋亡有关。
     
    在线客服
    热线电话

    微信公众账号